Techniques

Techniques

Les méthodes de génie génétique

Les premières plantes transgéniques ont été cultivées commercialement aux Etats-Unis il y a 20 ans. La culture s’est ensuite propagée au Canada et à plusieurs pays d'Amérique du Sud. La plupart des plantes transgéniques sont résistantes aux herbicides ou produisent une toxine qui tue les insectes nuisibles. La majorité d'entre elles sont le maïs, le colza, le soja et le coton. Le seul animal transgénique autorisé à la consommation est un saumon, distribué en Amérique du Nord.

Nouvelles techniques de modification génétique
Cisgénèse
Transgénèse

Les nouvelles techniques de génie génétique regroupent des procédés très divers. Actuellement, deux types de techniques ont accéléré et multiplié notre capacité d’intervention dans les génomes des êtres vivants. D’une part, les méthodes d’édition génomique sont utilisées pour modifier de manière permanente le matériel génétique des organismes vivants. D’autre part, l’interférence ARN réduit au silence l’expression de gènes "encombrants" sans forcément nécessiter une modification du génome. La plus utilisée est la technologie de l’édition génomique.

Ces techniques ont le potentiel de modifier en profondeur la physiologie des organismes et leur utilisation comportent des risques et des incertitudes qu'il convient d'étudier. Ceci principalement car le fonctionnement du génome est encore largement inconnu. Modifier l'inconnu, même de manière ciblée, revient à ne pas pouvoir prédire le résultat de nos modifications.

Édition génomique
L’édition génomique se réfère à diverses méthodes de biologie moléculaire qui sont utilisées afin de couper dans le matériel génétique et copier/coller de nouvelles séquences d’ADN à l’endroit de la coupure. Celle-ci est basée sur l’utilisation de ciseaux moléculaires, appelés nucléases programmables, qui coupent dans le génome et permettent, au travers du système de réparation de l’ADN des cellules, de muter, modifier et insérer des gènes existants ou entièrement synthétiques dans une multitude d’organismes végétaux et animaux et de passer outre la barrière des espèces. Par rapport aux méthodes conventionnelles, ces méthodes permettent une augmentation du nombre de changements fait au génome en une seule opération (multiplexing) et sont applicables à un nombre plus important d’organismes vivants.

Nucléases programmables
Les "nucléases programmables" sont des enzymes qui lisent une séquence cible de quelques paires de bases d’ADN dans le génome puis coupent à cet endroit comme des ciseaux. Les nucléases peuvent être programmées pour reconnaître une séquences choisies du génome. Les scientifiques peuvent donc choisir quel gène couper et « quelle longueur » couper dans le génome de l’organisme de leur choix.
Les nucléases provoquent une coupure des deux brins d'ADN qui déclenche à son tour un mécanisme de réparation cellulaire de l’ADN qui peut être de deux types. Le premier reconstitue presque sans erreur la séquence d’origine. Le deuxième « recolle » les brins en faisant des erreurs, soit par rajout ou supression de quelques lettres (les bases de l’ADN) ou alors de plus longues séquences. Il est difficile de contrôler quel mécanisme est utilisé, mais il est décisif pour les effets de la madification. Le mécanisme le plus utilisé par la cellule est celui qui commet des erreurs. Il est utilisé par les scientifiques pour muter ou inactiver les gènes. La séquence du gène coupé peut être inactivée en insérant ou en enlevant des bases individuelles ou remplacée par une autre séquence fonctionnelle (p. ex. un autre gène). Plusieurs types de nucléases sont utilisés avec des précisions et des effets secondaires divers.

L'interférence à ARN
L'interférence à ARN est un processus cellulaire endogène, c’est-à-dire qu’il existe de manière naturelle dans toutes les cellules, dans lequel des molécules d'ARN sont utilisées pour bloquer l’expression des gènes de manière ciblée et donc empêcher la synthèse de la protéine correspodnante. C'est le mécanisme utilisé par les cellule pour réguler l'expression des gènes en fonction de l'environnement et des besoins. Ce mécanismes est extrêmement complexe puisque des milliers de gènes sont régulés à chaque seconde. Ce procédé est utilisé en biotechnologie pour produire des pesticides et des plantes génétiquement modifiées aux caractères divers (par exemple une pomme qui ne produit pas une certaine substance par exemple).
Ces fragments d’ARN peuvent être :1) synthétisés directement dans l’organisme cible à partir d’un fragment d’ADN intégré artificiellement dans le génome et, donc, un OGM est créé ou 2) pulvérisés depuis l’extérieur et, donc, une nouvelle classe de pesticides aux effets inconnus est créée.

Nucléases à doigts de zinc
TALEN
CRISPR/Cas9

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